エンドトキシンはどのようにテストされていますか

2019-11-02

凍結乾燥アメーバ様細胞溶解物アッセイ (LALアッセイ)は、内毒素について最も一般的に使用されている試験である。カブトガニの青い血から抽出されたアメーバ様細胞を主に含む一種の凍結乾燥製品である、リムルスアメーバ様細胞溶解物(LAL)。

LALは、グラム陰性菌の細胞外膜に存在する小さな細菌由来の疎水性リポ多糖(LPS)分子である内毒素と反応して、定量可能なゲルクロットを形成する。エンドトキシンは、1ミリリットルあたりのエンドトキシン単位(EU / mL)で測定されます。

比濁技術および発色技術もエンドトキシンを検出するために使用される。

発色技術の反応原理は以下のとおりです。アメーバ様細胞溶解物は、バクテリアのエンドトキシンによって活性化される可能性のあるセリンプロテアーゼ酵素(プロ酵素)のカスケードを含んでいます。内毒素はプロ酵素を活性化して活性化酵素(コアグラーゼと呼ばれる)を生成し、後者は無色の基質の分割を触媒し、黄色の生成物pNAを放出する。放出されたpNAは405nmで測光的に測定することができる。そして吸光度は内毒素濃度と正に相関しているので内毒素濃度はそれに応じて定量することができた。

そして濁度法の反応原理は発色法のそれと同様である。


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